在治療實瘤時，通過免疫原化療結合檢查點阻斷劑，可以增強CAR-T細胞的招募能力并提高其抗腫瘤功效。基于這一原理，一些CAR-T細胞選擇將免疫檢查點抑制效果直接整合到它們的CAR結構中。在2023年9月，一種名為DuraCAR-T的CAR-T細胞表達了CD19，并抑制了NR2F6基因。在進行針對實瘤的外實驗制備過程中，研究人員發現原本應該抑制NR2F6基因mRNA表達的siRNA產生了相反的結果，從而可能產生適用于抑制自免疫病的CAR-T細胞。這種DuraCAR-T細胞來自Regen BioPharma，這是一家專注于使用mRNA和小分子療法治療癌癥和自免疫疾病的公司。他們的技平臺包括shRNA、雙重適配、激活和抑制NR2F6基因的小分子以及脂肪來源的干細胞。
NR2F6是一個在黑素瘤中發現的免疫檢查點靶點，屬于核激素（NRs）家族的員。NRs家族在正常細胞中控制增、代謝、特化細胞功能和免疫細胞活的調節途徑。在與激素相關的腫瘤中，NRs失調，并且起到調節腫瘤細胞與腫瘤微環境的通訊作用。不同的NRs在腫瘤中有不同的作用。例如，激活肝臟X可以減弱黑素瘤生態位的MDSC活，從而更有效地抑制轉移；而腫瘤來源的視黃酸可以導單核細胞分化為免疫抑制的腫瘤相關巨噬細胞，從而抑制免疫細胞的功能。NR2F6是孤兒核的一種，也被稱為Ear-2或COUP-TFIII，它是NR2F亞家族的員，與NR2F1和NR2F2蛋白有相關。NR2F6被認為是中樞神經系統炎癥和抗腫瘤反應的免疫抑制中心檢查點。在多種腫瘤中，如人類卵巢癌、宮頸癌、淋瘤、白病、胃腺癌、子宮癌、膀胱尿路上皮癌、腺侵襲癌組織和結直腸癌等，NR2F6的表達明顯高于非腫瘤組織。在淋細胞中，NR2F6在T細胞活化過程中起到關鍵調節因子的作用，在外和有效地拮抗抗原導的細胞因子反應。NR2F6的DNA結合TCR導的PKC信號傳導的直接控制，而PKC已知可以積極調整CD3 T細胞的活化閾值。NR2F6還在Th17細胞譜系中起到重要作用。在免疫細胞中，NR2F6能夠微調適應免疫并抑制編碼IL-2、IFN-γ、IL-17和IL-21等細胞因子的基因轉錄能力。腫瘤細胞源的NR2F6表達控制著T細胞的浸潤。在NR2F6缺乏的傳小鼠模型中，腫瘤浸潤效應T細胞的活增強，從而分泌更多的IFN-γ和IL-2，并加強CD8 T細胞記憶，表現出炎癥加速發展、呈現自免疫表型和減弱腫瘤生長的特點，顯示出比單獨使用PD-1治療更好的效果。此外，抑制NR2F6還能增強PD-1治療的反應。
Regen BioPharma的DuraCAR-T細胞表達了CD19并抑制了NR2F6，旨在通過其專有的NR2F6 shRNA抑制T細胞的衰竭，并促進活，以解決CAR-T在實瘤中的抗藥問題。在進行外實驗的第一階段中，研究人員功地合并在轉染細胞中表達了靶向CD19和NR2F6的CAR構建。然而，第二組實驗產生了意想不到的結果，其中用于沉默NR2F6 mRNA表達的siRNA產生了相反的效果，可能導致對自免疫的抑制作用。為了確定這些令人驚訝的發現是否可重復，該公司聘請了一個獨立于CRO的合同研究組織，使用公司專有的shRNA NR2F6抑制技進行后續實驗。
對于黑素瘤的免疫抑制檢查點NR2F6來說，與PD-1相比，它對T細胞分化的調節使其為免疫細胞療法的潛在靶點，這也說明了它可能對自免疫疾病產生反向作用的可能。
總結起來，在CAR-T治療腫瘤的環境中，仍然存在著一些技難題。目前，主要的CAR-T靶點仍以CD19和BCMA為主，其中Cartesian的Descartes-08是進展最快的，已經進到2期臨床階段。國的藥明巨諾和馴鹿生也參與了這一領域。然而，這些CAR-T結合mRNA的目的通常是通過瞬時轉染來降低CAR-T的毒，例如減病毒載量、降低細胞因子釋放的毒風險等。而Regen BioPharma的DuraCAR-T則是讓mRNA對T細胞的分化產生直接的調節作用，更針對免疫調節的直接機制。腫瘤和自免疫實際上是系統免疫的兩個方面。在基因調節的過程中，選擇一方就會出現另一方的“副作用”。下一步藥開發的關注點是如何通過單一siRNA調節來限制其變化，并避免出現毒風險。醫脈通致力于為專業的在線醫生平臺，通過知世界醫學脈搏，助力中國臨床決策。醫脈通擁有臨床指南、用藥參考、醫學文獻王、醫知源、e研通、e脈播等系列產品，全面滿足醫學工作者在臨床決策、獲取新知和提升科研效率等方面的需求。